最佳退火温度与tm值的关系(退火温度可以高于tm值吗)
大家好,小豪今天来为大家解答最佳退火温度与tm值的关系以下问题,退火温度可以高于tm值吗很多人还不知道,现在让我们一起来看看吧!
1、2.优化退火温度最好的方法是设置一系列对照反应,即通过在低于计算出的引物Tm值2-10度的温度范围内,进行退火的一系列平行反应来确定最佳退火温度。
2、退火温度低于引物Tm值5 ℃左右,一般在45~55℃。
3、相反,提高退火温度虽然可以提高反应的特异性,但会引起扩增效率下降,甚至无扩增产物出现。
4、不同的PCR MIX所设置的退火温度是不一样的,有的比最低Tm值低5℃,有的低3℃,请你参考你所买的PCR MIX的说明书,上面肯定有详细说明。
5、根据查询pcr相关信息得知,pcr退火温度降至Tm值5℃。
本文到此讲解完毕了,希望对大家有帮助。